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Figura 1. Se aisló ARNm de estas fracciones y se generaron datos de micromatriz.

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Figura 2. LGR5 se sobreexpresa en tumores epiteliales humanos.

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Se muestran datos de micromatriz de la expresión de ARNm de LGR5 de una gran cantidad de tumores humanos en comparación con muestras tisulares de marcador cuidado ca próstata irco humanos normales. El nivel de expresión de LGR5 en muestras de pacientes individuales se indica mediante líneas discontinuas verticales en el eje horizontal de cada tipo de tejido.

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LGR5 se sobreexpresa en la mayoría de las muestras tumorales con respecto a la expresión en el tejido normal correspondiente. Figura 3. LGR6 muestra expresión alterada en tumores epiteliales humanos. Se muestran datos de micromatriz de la expresión de ARNm de LGR6 de una marcador cuidado ca próstata irco cantidad de tumores humanos en comparación con muestras tisulares de tejidos humanos normales. El nivel de expresión de LGR6 en muestras de pacientes individuales se indica mediante líneas discontinuas verticales en el eje horizontal de cada tipo de tejido.

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Figura 9. La presente invención se basa en parte en el descubrimiento de células madre de tumor sólido también denominadas células marcador cuidado ca próstata irco cancerosas o células madre cancerosas de tumor sólido como un subconjunto distinto y limitado de células dentro de la población celular heterogénea de tumores sólidos establecidos.

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La identificación de células madre cancerosas se basa en 1 su expresión de un patrón marcador cuidado ca próstata irco de receptores de superficie celular usados para aislarlas de la mayoría de las células tumorales no tumorigénicas y 2 sus propiedades de autorrenovación y proliferación, evaluadas en modelos animales de xenoinjerto. En determinadas realizaciones, la divulgación proporciona de este modo un método para direccionar de modo selectivo agentes diagnósticos o terapéuticos contra células marcador cuidado ca próstata irco cancerosas.

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En algunas realizaciones, los agentes son anticuerpos que se unen específicamente a al menos una proteína RSPO o inhiben al menos una proteína LGR. Para facilitar un entendimiento de la presente invención, a continuación se definen diversos términos y frases:. Las diferentes clases de inmunoglobulinas tienen estructuras subunitarias diferentes y bien conocidas y configuraciones tridimensionales.

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En tercer lugar, las células madre de tumor sólido probablemente marcador cuidado ca próstata irco dividen de forma tanto asimétrica como asimétrica, de tal manera que la división celular simétrica no es una propiedad estricta. Estas propiedades de autorrenovación y proliferación para generar otras células tumorales confieren a las células madre cancerosas de la presente divulgación la capacidad de formar tumores palpables después de un trasplante en serie en un ratón inmunocomprometido en comparación con la mayoría de las marcador cuidado ca próstata irco tumorales que no pueden formar tumores después de un trasplante en serie.

La correlación puede relacionarse con una expresión aumentada o disminuida del gen por ejemplo, niveles aumentados o disminuidos de ARNm o del péptido codificado por el gen.

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Los intrones son segmentos de un gen que se transcribe en ARN nuclear ARNnh ; los intrones pueden contener elementos reguladores tales como potenciadores. Por ejemplo, un gen heterólogo incluye un gen de una especie introducido en otra especie.

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También se proporcionan métodos para el uso de los anticuerpos in vivo o in vitro, para Inhibir la señalización de la beta catenina.

En determinadas realizaciones, los anticuerpos se unen específicamente a una proteína RSPO humana.

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También se proporcionan líneas celulares que producen los anticuerpos y las composiciones que comprenden los anticuerpos. También se proporcionan métodos para el uso de los anticuerpos, in vivo o in vitro, para inhibir la señalización de la beta catenina. Figura 1.

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Se aisló ARNm de estas fracciones y se generaron datos de micromatriz. Figura 2. LGR5 se sobreexpresa en tumores epiteliales humanos. Se muestran datos de micromatriz de la expresión de ARNm de LGR5 de una gran cantidad de tumores humanos en comparación con muestras tisulares de tejidos humanos normales.

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El nivel de expresión de LGR5 en muestras de pacientes individuales se indica mediante líneas discontinuas verticales en el eje horizontal de cada tipo de tejido. LGR5 se sobreexpresa en la marcador cuidado ca próstata irco de las muestras tumorales con respecto a la expresión en el tejido normal correspondiente. Figura 3.

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LGR6 muestra expresión alterada en tumores epiteliales humanos. Se muestran datos de micromatriz de la expresión de ARNm de LGR6 de una gran cantidad de tumores humanos en comparación con muestras tisulares de tejidos humanos normales.

El nivel de expresión de LGR6 en muestras de pacientes individuales se indica mediante líneas discontinuas verticales en el eje horizontal de cada tipo de tejido. La expresión de LGR6 muestra expresión alterada en muchas muestras de tumor con respecto a la expresión en el marcador cuidado ca próstata irco normal correspondiente. Figura 4.

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RSP01 activa la señalización de la beta catenina. RSPFc indujo la actividad luciferasa del promotor sensible a la beta catenina de una manera dependiente de la dosis. Figura 5. Figura 6.

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Figura 7. Figura 8. Identificación de los mAb anticuerpos monoclonales contra LGR5. Después, las muestras se realizaron mediante citometría de flujo.

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Figura 9. La presente invención marcador cuidado ca próstata irco basa en parte en el descubrimiento de células madre de tumor sólido también denominadas células madre cancerosas o células madre cancerosas de tumor sólido como un subconjunto distinto y limitado de células dentro de la población celular heterogénea de tumores sólidos establecidos. Estas células madre cancerosas comparten las propiedades de las células madre normales ya que proliferan ampliamente y dan lugar eficazmente a células madre tanto de tumor sólido adicionales autorrenovación como a la mayoría de células tumorales de un tumor sólido que carecen de potencial tumorigénico.

La identificación de células madre cancerosas se basa en 1 su expresión de un patrón exclusivo de receptores de superficie celular usados para aislarlas de la mayoría de las células tumorales no tumorigénicas y 2 marcador cuidado ca próstata irco propiedades de autorrenovación y proliferación, evaluadas en modelos animales de xenoinjerto.

En determinadas realizaciones, la divulgación proporciona de este modo un método para direccionar de modo selectivo agentes diagnósticos o terapéuticos contra células madre cancerosas.

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En determinadas realizaciones, la divulgación también proporciona un agente, tal como una biomolécula, que se dirige selectivamente a células madre. La presente invención identifica la expresión de células madre cancerosas ya que comprenden niveles elevados de LGR5 receptor 5 acoplado a proteína G que contiene repeticiones ricas en leucina en comparación con células tumorales no tumorigénicas.

La presente invención también identifica una interacción entre RSP01 y LGR5 que activa una ruta de señalización Adelgazar 72 kilos de la beta catenina. Las R-espondinas RSPO son una familia de marcador cuidado ca próstata irco proteínas pequeñas secretadas que se ha reconocido recientemente que estimulan a la beta catenina de una manera similar a la señalización de Wnt.

La presente invención identifica una ruta alternativa mediante proteínas Marcador cuidado ca próstata irco y proteínas LGR que pueden dar lugar a la activación de la beta catenina en células tumorales. En realizaciones adicionales, los agentes inhiben el crecimiento tumoral, incluyendo el crecimiento de tumores sólidos que comprenden células madre cancerosas.

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En algunas realizaciones, los agentes son anticuerpos que se unen específicamente a al menos una proteína RSPO o inhiben al menos una proteína LGR. Para facilitar un entendimiento de la presente invención, a continuación se definen diversos términos y frases:.

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Las diferentes clases de inmunoglobulinas tienen estructuras subunitarias diferentes y bien conocidas y configuraciones tridimensionales. Los anticuerpos pueden ser anticuerpos desnudos o pueden conjugarse con otras moléculas, tales como toxinas, radioisótopos, etc.

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En su mayor parte, los anticuerpos humanizados son inmunoglobulinas humanas anticuerpo receptor en las que los restos de una región hipervariable del receptor se reemplazan por restos de una reglón hipervariable de una especie no humana anticuerpo donante tal como un ratón, rata, marcador cuidado ca próstata irco o primate no humano que tiene la especificidad, afinidad, y capacidad deseadas.

Estas modificaciones se realizan generalmente para refinar adicionalmente el rendimiento de los anticuerpos. En la Patente de Estados Unidos 5. Normalmente, la reglón variable de las cadenas tanto ligera como pesada corresponde a la región marcador cuidado ca próstata irco de los anticuerpos procedentes de una especie de mamífero por ejemplo ratón, rata, conejo, etc. Se entiende que un anticuerpo o fracción de unión, que se une específicamente a una primera diana, puede unirse específicamente o no a una segunda diana.

Generalmente, aunque no necesariamente.

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Como ejemplos se incluyen, pero sin limitación, las quimeras CD4-lgG biespecíficas descritas en Berg et al. Las células madre cancerosas experimentan autorrenovación frente a diferenciación de una manera caótica para formar tumores con tipos de células marcador cuidado ca próstata irco que con el tiempo pueden cambiar a medida que se producen mutaciones. En tercer lugar, las células madre de tumor sólido probablemente se dividen de forma tanto asimétrica como asimétrica, de tal manera que la división celular simétrica no es una propiedad estricta.

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Estas propiedades de autorrenovación y proliferación para generar otras células tumorales confieren a las células madre cancerosas de la presente divulgación la capacidad de formar tumores palpables marcador cuidado ca próstata irco de un trasplante en serie en un ratón inmunocomprometido en comparación con la mayoría de las células tumorales que no pueden formar tumores después de un trasplante en serie.

La correlación puede relacionarse con una expresión aumentada o disminuida del gen por ejemplo, niveles aumentados o disminuidos de ARNm o del péptido codificado por el gen.

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La expresión génlca puede regularse en muchas fases en el proceso. En la descripción y en los ejemplos indicados a continuación pueden encontrarse otros ejemplos no limitantes.

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La expresión génica puede medirse utilizando cualquier marcador cuidado ca próstata irco adecuado, incluyendo, pero sin limitación, los descritos en el presente documento. La selección del tratamiento puede incluir la elección de un agente quimioterapéutico particular u otra modalidad de tratamiento tal como cirugía o radiación o una elección sobre si suministrar terapia o retirarla.

Los intrones son segmentos de un gen que se transcribe en ARN nuclear ARNnh ; los intrones pueden contener elementos reguladores tales como potenciadores.

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Por ejemplo, un gen heterólogo incluye un gen de una especie introducido en otra especie. La expresión génica puede marcador cuidado ca próstata irco a diversas fases en el proceso. Los ARNip también pueden contener secuencias adicionales; como ejemplos no limitantes de dichas secuencias se incluyen secuencias de unión, o bucles, así como estructuras en tallo y otras estructuras plegadas.

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Los ARNip parecen actuar como productos intermedios clave en el desencadenamiento de la interferencia del ARN en invertebrados y en vertebrados, y en el desencadenamiento de la degradación de ARN específica de marcador cuidado ca próstata irco durante el silenciamiento génico postranscripcional en plantas. La expresión del gen se inhibe bien completamente o parcialmente.

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El tamaño marcador cuidado ca próstata irco los fragmentos puede variar de cuatro nucleótidos a toda la secuencia de nucleótidos menos un nucleótido 10 nucleótidos, 20, 30, 40, 50, etc. También pueden obtenerse condiciones rigurosas con la adición de agentes desestabilizantes tales. Para una hibridación de alta rigurosidad, una señal positiva es de al menos dos veces el marcador cuidado ca próstata irco, o diez veces la hibridación del fondo. Por ejemplo, una secuencia de ADN determinada por ejemplo, un gen se encuentra en el cromosoma de la célula hospedadora cerca de genes adyacentes; las secuencias de ARN, tales como una secuencia de ARNm específica que codifica una proteína específica, se encuentra en la célula como una mezcla con numerosos otros Perdiendo peso que codifican una multitud de proteínas.

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